PH1294 | 钙盐染色液（Von Kossa银法）

货号：PH1294

规格：3×50mL| 3×100mL

保存：常温运输与保存，有效期至12 个月。

产品说明：

钙在人体内大量存在，构成骨骼作为支持人体的支架，在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。钙在机体内以两种形式存在，一种是离子钙，存在血液循环内，即所谓血钙；另一种是结合钙，和蛋白、碳酸或磷酸结合而沉着在组织内。除骨骼和牙齿外，正常时钙渗透在所有组织和细胞中，一般不以固体状态出现在组织内。但在某些情况下，钙析出成固体并沉着于组织内，则为病理性钙盐沉着。沉着的钙盐主要是磷酸钙，其次为碳酸钙。钙盐通常是单折射的，但草酸钙是双折射的。当使用 HE 染色时，钙一般呈紫蓝色。许多染料可以于钙形成螯合物，包括茜素红 S、红紫素、核固红等。茜素红 S 属一种蒽醌类衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。

钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红 S 法， 钙盐染色液采用 Von Kossa 硝酸银法，其原理在于该法是一种金属置换法，硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时，钙被银所置换，银盐在光的作用下被还原为黑色金属银，适用于大量样本的钙盐组织染色。

产品组成

操作步骤（仅供参考）：

1、组织固定于 10%中性福尔马林，常规脱水包埋。

2、切片厚度 5μm 常规脱蜡至水。

3、蒸馏漂洗几次。

4、切片入 Von Kossa 银溶液中（建议透明材质玻璃瓶），强光照射20min（或在60-100瓦的灯泡前放置1小时或更长时间）孵育切片。 注意：如果染色比较浅或在洗涤步骤中被冲洗掉，则表明紫外线强度不足，建议延长染色时间至几个小时不等。

5、蒸馏漂洗几次。

6、加入海波溶液处理 2-5min。

7、蒸馏水漂洗。

8、用核固红复染5分钟。

9、蒸馏水漂洗。

10、通过分级的酒精脱水，并在二甲苯中澄清。

11、中性树胶封固。

实验结果：

钙盐 黑褐色至深黑色

细胞核 红色

细胞质 红色/粉色

注意事项：

1、紫外线通常会产生更强的反应，因此钙盐通常会染成黑色。 普通的60-100瓦的灯泡通常反应较弱，因此钙盐经常染成棕黑色。

2、通常认为草酸盐会产生阴性的von Kossa染色。

3、如有必要，可做阴性对照。这是通过在步骤4之前在10％的甲酸中处理测试载玻片10分钟来完成的。测试载玻片应显示阴性反应。

4、钙盐组织固定以中性福尔马林为佳，不宜采用 Bouin 液等酸性固定液和甲醛钙固定液。如用常规的 10%福尔马林固定，固定 4～6h 后

即可进行脱水包埋，以防止固定液酸化导致钙盐溶解。